Poly(U) 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Poly(U) 聚合酶催化由 UTP 或 ATP 转化的 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端，该反应不依赖模板的存在。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）Cid1 的 poly(U) 聚合酶基因。

产品类别:
cDNA Synthesis & Reverse Transcriptases Products,
RNA Synthesis In vitro Transcription (IVT)

应用:
PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0337S     -20    
        Poly(U) Polymerase M0337SVIAL -20 1 x 0.03 ml 2,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 50 µl 反应体系中，37℃ 条件下，10 分钟催化 1 nmol 的 UMP 掺入 RNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 2
    Supplement with 0.5 mM UTP 
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 2
    50 mM NaCl
    10 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    1 mM DTT
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

    单位活性检测条件

    50 µl 反应体系，含 1X NEBuffer 2、0.5 mM 3H UTP 和 5 µg 酵母 RNA，37℃ 温育 10 分钟。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 用 UTP 标记 RNA
    • 为 RNA 添加 Poly(U) 和 Poly(A) 尾，用于克隆
    • 研究加 poly(U) 尾对 RNA 转染至真核细胞的稳定性及翻译效率的影响
    • 2´ O-甲基的 3´ 修饰末端添加 poly(A) 尾

  • 相关产品

    相关产品

    • m0307-rnase-inhibitor-human-placenta
    • 小鼠 RNase 抑制剂
    • rNTP 套装

    单独销售的组分

    • NEBuffer 2

  • 注意事项

    1. 本产品不包含 UTP。
    2. 在 NEBuffer 2 中，Poly(U) 聚合酶催化 rNTP 转化成的 rNMP 掺入 RNA。poly(U) 加尾长度随 UTP 变化。Poly(U) 聚合酶在低引物浓度（< 100 pmol）下具有极高的掺入率。

  • 参考文献

    1. Wickens, M. and Kwak, J.E. (2008). Science. 319, 1344.
    2. Kwak, J.E. and Wickens, M. (2008). RNA. 13, 860.
    3. Rissland, O.O.S., Mikulasova, A. and Norbury, C.J. (2007). Molecular and Cell Biology. 27, 3612.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. A Typical Tailing Reaction (M0337)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • RNA Polymerase Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the molecular weight of Poly(U) Polymerase?
    2. What type of labeled-UTPs will the Poly(U) Polymerase incorporate?
    3. Will Poly(U) Polymerase incorporate GTPs onto the 3’ end of an RNA?
    4. What Poly(U) length can be expected to be incorporated by Poly(U) Polymerase?
    5. Can Poly(U) Polymerase incorporate GTPs onto an RNA that contains chemically modified or 2-O-methyl groups on its 3’ end?
    6. How can the Poly(U) Polymerase be inactivated without heating up the reaction?
    7. Does the E. coli Poly(U) Polymerase work in the M-MuLV reverse transcriptase buffer?
    8. Can Poly(U) Polymerase be used to add a poly U tail to ssDNA?

  • 实验技巧

    强烈建议戴手套、使用无核酸酶的试管和试剂并彻底清洁移液器和工作台表面，避免 RNase 污染。