低分子量 DNA Ladder |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

包含多种已获专利的质粒，此类质粒经适当的限制性内切酶消化完成后，产生的 11 条条带适合用作琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的分子量标准。消化后的 DNA 包含 25 bp 到 766 bp 的片段。200 bp 条带的强度更高，可用作参照带。

随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料，无 SDS。


低分子量 DNA Ladder |
产品类别:
DNA Markers & Ladders Products

应用:
DNA Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • N3233V     -20    
        Low Molecular Weight DNA Ladder N3233VVIAL -20 1 x 0.05 ml 500 µg/ml
        Gel Loading Dye, Purple (6X), no SDS B7025VVIAL 25 1 x 0.2 ml 6 X
    • N3233S     -20    
        Low Molecular Weight DNA Ladder N3233SVIAL -20 1 x 0.1 ml 500 µg/ml
        Gel Loading Dye, Purple (6X), no SDS B7025SVIAL 25 1 x 1 ml 6 X

  • 特性和用法

    碱基

    Fragment Mass (ng) bp
    1 42 766
    2 27 500
    3 20 350
    4 33 300
    5 27 250
    6 110 200
    7 33 150
    8 43 100
    9 58 75
    10 63 50
    11 43 25

    有效大小范围

    25bp to 766bp

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    1 mM EDTA
    pH 8 @ 25°C

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    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）

    单独销售的组分

    • 6X 紫色凝胶上样染料，无 SDS

  • 注意事项

    1. 建议使用上样缓冲液稀释，并取 0.5 µg 的低分子量 DNA Ladder 进行上样。
    2. 此 Ladder 不适用于对 DNA 进行精确定量，但是可对分子量大小相近的样品进行粗略定量。
    3. 所有末端均有 5´ 突出末端，可使用 T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK，#M0201）对末端进行标记，或使用 DNA 聚合酶 I Klenow 片段（#M0210）补平（1）。使用 α-[32P] dCTP 或 α-[32P] dGTP 进行补平反应。
    4. DNA Ladder 可在 4℃ 环境中稳定贮存至少 3 个月。
    5. 长期贮存时，请贮存在 -20℃ 环境中。如需稀释样本，请使用 TE 或离子强度极低的其它缓冲液。如果使用 dH2O 稀释，DNA 可能会变性
    6. 1 管紫色凝胶上样染料，无 SDS：
      2.5% Ficoll®-400
      10 mM EDTA
      3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0@25℃）
      0.02% 染料 1
      0.001% 染料 2
    7. 由于技术的局限性，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时，可能会在 DNA Ladder 上看到一两条额外的条带。

  • 参考文献

    1. Sambrook, J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (2nd ed. 10.51-10.67.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. End-labeling Protocol
    2. Suggested Loading Protocol for DNA Ladders & Markers

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Markers & Ladders Selection Tool

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Why are there extra bands visible on polyacrylamide gels?
    2. Why is the separation of the lower bands incomplete?
    3. What are the overhangs on the DNA ladder fragments? Can I end-label them using the T4 polynucleotide kinase (PNK)? What about the Klenow fragment?
    4. Why are the DNA ladders showing up on my Southern blot? What is the sequence or composition of the ladder bands?
    5. How can I quantify the amount of DNA in each band of a marker?
    6. Can I use Midori Green with the DNA Ladders from NEB?
    7. Can I use SYBR® and/or GelRed® dyes with the DNA Ladders from NEB?
    8. Why is my DNA Ladder floating out the wells and Why are there no bands visible in my DNA ladder gel lane?
    9. Can I use GelRed® with the Low Molecular Weight and 50 bp DNA Ladders from NEB?

  • 实验技巧

    推荐使用 TE 缓冲液而非水稀释，配制成即用型。