LongAmp® 热启动 Taq 2X 预混液 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

LongAmp 热启动 Taq 2X 预混液包含基于核酸适配体的热启动 Taq 聚合酶和 Deep Vent® DNA 聚合酶的独特混合物。这种基于核酸适配体的抑制剂可与酶可逆结合，在温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性，而在正常的 PCR 循环条件下释放酶。此特性有助于在室温下建立 PCR 反应体系。LongAmp® 热启动 Taq 2X 预混液无需单独的高温温育步骤来激活酶。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶活性提升了热启动 Taq DNA 聚合酶（1）的保真性和聚合能力。LongAmp® 热启动 Taq DNA 聚合酶的保真度是热启动 Taq DNA 聚合酶的两倍。这款便捷的 2X 预混液包含 dNTP 和 Mg++，仅需加入引物和 DNA 模板，即可稳健扩增。可以 Lambda DNA 或人类基因组 DNA 为模板，合成多种不同大小的 PCR 产物，最长可达 30 kb。

LongAmp® 热启动 Taq 2X 预混液 |
以不同量的 Jurkat 基因组 DNA 为模板，用 LongAmp 热启动 Taq 2X 预混液扩增 8 kb 扩增子。起始模板量标注在电泳胶下方。Marker (M) 是 1 kb Plus DNA Ladder（NEB #N3200）。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自水生嗜热菌（Thermus aquaticus）YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因；大肠杆菌菌株，携带有克隆自 Pyrococcus GB-D 的 Deep Vent® DNA 聚合酶基因。

单位定义：
1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

单位测定条件：
1X ThermoPol™ 反应缓冲液、200 µM dNTP（包括 [3H]-dTTP）和 200 µg/ml 活化小牛胸腺 DNA。

产品类别:
LongAmp® DNA Polymerases Products,
Master Mixes Products

应用:
Hot Start PCR,
Long Range PCR,
Multiplex PCR,

Specialty PCR,
Routine PCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0533S     -20    
        LongAmp® Hot Start Taq 2X Master Mix M0533SVIAL -20 2 x 1.25 ml 2 X
    • M0533L     -20    
        LongAmp® Hot Start Taq 2X Master Mix M0533SVIAL -20 10 x 1.25 ml 2 X

  • 特性和用法

    1X 预混液组分

    60 mM Tris-SO4
    20 mM (NH4)2SO4
    2 mM MgSO4
    3% Glycerol
    0.06% IGEPAL® CA-630
    0.05% Tween® 20
    0.3 mM dNTPs
    125 units/ml LongAmp® Hot Start Taq DNA Polymerase
    pH 9.1 @ 25°C

    热失活

    否

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    Yes

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    Yes

    链置换

    +

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 高特异性长片段 PCR
    • 高通量 PCR
    • 菌落 PCR

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 套装
    • dNTP 混合液
    • LongAmp® Taq PCR 试剂盒
    • Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution
    • LongAmp® Taq DNA 聚合酶
    • LongAmp® 热启动 Taq DNA 聚合酶

  • 注意事项

    1. Product specifications for individual components in the LongAmp Hot Start Taq 2X Master Mix are available separately.

  • 参考文献

    1. Barnes, W.M. (1994). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91, 1350-1354.
    2. Saiki R.K. et al. (1985). Science. 230, 1350-1354.
    3. Powell, L.M. et al (1987). Cell. 50, 831-840.
    4. Sun, Y., Hegamyer, G. and Colburn, N. (1993). Biotechniques. 15, 372-374.
    5. Sarkar, G., Kapelner, S. and Sommer, S.S. (1990). Nucleic Acids Res.. 18, 7465.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for LongAmp™ Hot Start Taq 2X Master Mix

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Guidelines for PCR Optimization with Taq DNA Polymerase
    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What ends will my PCR products have?
    2. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    3. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    4. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    5. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    6. Is Monarch-purified gDNA suitable for long-range PCR?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide
    • Taq PCR Kit Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    建议在 LongAmp 热启动 Taq 反应中的延伸温度为 65℃ 。