NheI |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

NheI 提供高保真版 NheI-HF®（NEB #R3131）。

高保真（HF）限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液（10X）中具有 100% 活性；统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶（Time-Saver）标准，可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA，也可实现过夜酶切而不会降解 DNA。HF 限制性内切酶在改造时将性能作为重要指标，可在更宽的条件下具有完全活性，最大限度地减少非特异性酶切产物，并且为实验设计提供灵活性。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自粘液奈瑟菌（Neisseria mucosa heidelbergensis）（ATCC 25999）的 NheI 基因。

产品类别:
Discontinued (<3 years)

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA（HindIII 酶切）所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 2.1
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 2.1
    50 mM NaCl
    10 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    100 µg/ml BSA
    (pH 7.9 @ 25°C)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer™ 1.1: 100%
    NEBuffer™ 2.1: 100%
    NEBuffer™ 3.1: 10%

    稀释兼容性

    • 稀释液 C

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    250 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    0.15% Triton® X-100
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

    甲基化敏感性

    dam 甲基化: 不敏感
    dcm 甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

  • 相关产品

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    • NheI-HF®
    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）
    • Nuclease-free Water

    单独销售的组分

    • 6X 紫色凝胶上样染料
    • NEBuffer 2.1

  • 注意事项

    1. 酶切产生的 5´ CTAG 突出末端可以与 AvrII、SpeI 或 XbaI 酶切产生的 DNA 片段有效地连接。
    2. 当盐浓度 > 100 mM 时，酶活性被抑制。
    3. 该酶在酶切某些超螺旋质粒时活性较低，酶切 1 μg 质粒 DNA 需要超过 1 个单位的酶量。如需完全酶切 1 μg 质粒 DNA，请采用我们推荐的酶切方案。
    4. 某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Optimizing Restriction Endonuclease Reactions
    2. Restriction Digest Protocol
    3. Double Digest Protocol with Standard Restriction Enzymes

  • 使用指南

    • Activity at 37°C for Restriction Enzymes with Alternate Incubation Temperatures
    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Cleavage Close to the End of DNA Fragments
    • Digestion of Agarose-Embedded DNA: Info for Specific Enzymes
    • Double Digests
    • Effects of CpG Methylation on Restriction Enzyme Cleavage
    • Heat Inactivation
    • NEBuffer Activity/Performance Chart with Restriction Enzymes
    • Optimizing Restriction Endonuclease Reactions
    • Restriction Endonucleases – Survival in a Reaction
    • Restriction Enzyme Diluent Buffer Compatibility
    • Restriction Enzyme Tips
    • Single Letter Codes
    • Site Preferences
    • Star Activity
    • Traditional Cloning Quick Guide

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Alphabetized List of Recognition Sequences
    • Cleavage of Supercoiled DNA
    • Compatible Cohesive Ends and Generation of New Restriction Sites
    • Dam-Dcm and CpG Methylation
    • Frequencies of Restriction Sites
    • Isoelectric Points (pI) for Restriction Enzymes
    • Isoschizomers
    • NEB Diluent and Buffer Table
    • Recleavable Filled-in 5′ Overhangs
    • Time-Saver™ Qualified Enzymes
    • Why Choose Recombinant Enzymes?

  • Web 工具

    • Competitor Cross-Reference Tool
    • DNA Sequences and Maps Tool
    • Double Digest Finder
    • Enzyme Finder
    • NEBcutter™ v3.0
    • NEBioCalculator®
    • REBASE®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Is NheI affected by methylation?
    2. Are more units of NheI required to cut supercoiled DNA than lambda DNA?
    3. Is NheI inhibited by salt?
    4. Is NheI active at 25°C?
    5. Does NheI produce commonly used compatible ends?
    6. Do I have to set-up digests with Time-Saver™ qualified enzymes for 5-15 minutes? Can I digest longer?
    7. Which NEB restriction enzymes are supplied with Gel Loading Dye, Purple (6X)?

  • 问题解决指南

    • Restriction Enzyme Troubleshooting Guide